食品中菌落總數反映了食品在生產過程中的衛(wèi)生情況,體現食品被細菌污染的程度,是做出科學衛(wèi)生評價的重要指標之一。本文主要對國標法微生物檢測中菌落總數測定采用的傳統(tǒng)方法即平板計數法的注意事項進行相關的分析,并著重介紹了快速檢測技術在菌落總數檢測中的應用。
菌落總數檢測快速檢測新技術:
13M測試片快速分析技術
13M測試片快速分析技術概念3M測試片法是一種便捷可再生水化干膜,適用于細菌和真菌的計數。只需三步就可實現快速準確的測定。
①測試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計算之).②測試片上沒有任何菌落生長.③有不多的菌落.④測試片菌落數適宜計數范圍是25-250⑤測試片面積約為20cm2,當菌落數超過250個,如5所示,為了估計菌落數,可選擇其中一個或數個有代表性菌落的小方格(1cm2),計算平均菌落數,再乘以20可得到整個測試片上的菌落數.⑥測試片上菌落太多而無法計數⑦有很多高數量菌落,使整個生長區(qū)變粉色,應計錄為菌落太多無法計數。⑧有時菌落分布出現不均衡,如8所示,這也記錄為菌落太多無法計數。⑨測試片上的菌落,粗略一看是可計數的,然而,你密切注意到生長區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應記錄為菌落太多無法計數。
測試片法特點
工作效率的提高根據大量數據統(tǒng)計,使用3M測試片技術,可以提高實驗室工作效率118%以上。勞動資源的使用帶來生產能力的提高,終的效果就是效益的增加。1.4.2標準化的檢測方法品質穩(wěn)定的快速測試片克服了傳統(tǒng)的測試方法存在的由于使用不同批次的培養(yǎng)基,不同的配制條件,不同配制人員而導致的差異性。1.4.3化的認證方法3M快速測試的方法得到包括AOAC,AFNOR在內的機構的認證,在許多國家也已獲得*機構的正式批準,從而可以確保檢測結果的可靠性和在世界各地的廣泛認可。1.4.4快速得到檢測結果對比傳統(tǒng)的測試方法,3M快速測試片縮短檢測時間,使您在更短的時間內獲得樣品的測試結果,能更加迅速地采取有效的措施解決發(fā)現的問題。1.4.5方便進行HACCP認證由于檢測速度快,檢測項目全,準確性高。3M為食品生產工藝過程中關鍵控制點的監(jiān)控提供了較為完整的系列產品,可以對包括生產線,生產設備和環(huán)境在內的各個環(huán)節(jié)進行全面的測試。
ATP法
ATP熒光法檢測總菌落數原理
螢火蟲會發(fā)光是由于它能合成將化學物質的化學能轉變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;熒光素酶、蟲熒光素(D-luciferin)以及所有細胞生物都產生的生物能量物質—三磷酸腺苷(ATP)。在有氧的條件下,蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應,形成氧化熒光素并發(fā)出熒光。
ATP法特點:
具有成本低,操作簡單,響應速度快等特點2.2.2微生物ATP生物發(fā)光法在國外已被廣泛地運用于食品中菌落總數的測定。
MTT法
MTT法檢測原理
檢測原理為活體微生物線粒體中含有琥珀酸脫氫酶,能使外源性MTT(噻唑藍)還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。Formazan結晶形成的量與活菌數成正比。用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活菌細胞數量。
流式細胞術
流式細胞術檢測原理檢測原理:細胞經特異熒光素標記后,通過激光照射,產生特異熒光信號,通過對這些熒光信號的檢測和定量計算出菌群總數。特點:快速、便捷結果可靠、便于操作。
結語
菌落總數檢測是微生物檢測中常見的項目,在檢驗的每一個環(huán)節(jié)都應該小心謹慎,準確操作,確保檢測結果的準確度。國標法采用的平板計數法是我們常用的檢測方法,但是操作過程較為復雜,時間較長;而其他方法操作簡便,省時,但是有的成本相對較高,并且有的只針對特定的食品種類。我們應該積極關注新的科學技術在檢測方法中的應用,讓檢測更加準確、經濟、便捷和可靠。